大鼠亞甲基四氫葉酸還原酶ELISA試劑盒說明

浏览量: 135   / 时间:2019-12-16   /作者:线上体育平台

本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中大鼠5,10亞甲基四氫葉酸還原酶(MTHFR)水平。用純化的大鼠5,10亞甲基四氫葉酸還原酶(MTHFR)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入5,10亞甲基四氫葉酸還原酶(MTHFR),再與HRP標記的羊抗大鼠抗體結合,线上体育平台形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的5,10亞甲基四氫葉酸還原酶(MTHFR)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中大鼠5,10亞甲基四氫葉酸還原酶(MTHFR)含量。

4、細胞培養上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。

5、組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。

以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數;或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數,即為樣品的實際濃度。